Efecto de la congelación-descongelación del semen ovino sobre el estado funcional de la membrana plasmática del espermatozoide utilizando un diluyente para bovinos

Abstract

the percentage of progressive motility (MP), percentage of live sperm (EV) and the functional status of the plasma membrane of sperm sheep in fresh semen (SF), refrigerated (SR) and frozen (SC) were determined. two rams adults in the Kathadin race were used, and 16 ejaculates were collected during the months of June, July, August and September 2005. It was used as diluent Triladyl (diluent originally used in the conservation of bovine semen) with egg yolk 20% and was packaged in 0.5 ml straws; Semen was refrigerated for 24 hours and then frozen in liquid nitrogen at -196 ° C. The functional state of the plasma membrane was determined by the fluorescent staining pattern chlortetracycline: sperm untrained (NC), trained (CA) and acrosome reaction (RA). It was found that the average values ​​(± SD) MP and EV were statistically different in each treatment (p <0.05), obtaining the highest for the SF (87% ± 0.2% and 85% ± 0.16%, respectively) values, compared to SR (67% ± 0.2% and 77% ± 0.18%, respectively) and SC (40% ± 0.26% and 60% ± 0.18%, respectively). During cooling increased significantly (p <0.05) the proportion of CA (68% ± 0.27%) and RA (13% ± 0.19%) sperm, with respect to SF; while freezing significantly reduced (p <0.05) the percentage of sperm NC, with respect to the SR. The Triladyl is a diluent capable of cryopreserved sheep semen, although it failed to prevent the decrease in viability, mobility and damage to sperm membranes. During cooling sperm experiencing the most damage, mobility, viability and function of the plasma membrane.

Se determinaron los porcentajes de movilidad progresiva (MP), porcentajes de espermatozoides vivos (EV), así́ como el estado funcional de la membrana plasmática del espermatozoide ovino en el semen fresco (SF), refrigerado (SR) y congelado (SC). Se utilizaron dos moruecos adultos de la raza Kathadín, y se colectaron 16 eyaculados durante los meses de junio, julio, agosto y septiembre de 2005. Se utilizó́ como diluyente el Triladyl (diluyente originalmente utilizado en la conservación del semen bovino) con yema de huevo al 20% y se envasó en pajillas de 0.5 ml; el semen se refrigeró durante 24 horas y después se congeló en nitrógeno líquido a -196°C. El estado funcional de la membrana plasmática se determinó́ según el patrón de tinción con clortetraciclina fluorescente: espermatozoides no capacitados (NC), capacitados (CA) y con reacción acrosomal (RA). Se encontró́ que los valores promedio (±DE) de MP y EV fueron diferentes estadísticamente en cada tratamiento (p<0.05), obteniendo los valores más altos para el SF (87% ± 0.2% y 85% ± 0.16%, respectivamente), en comparación con el SR (67% ± 0.2% y 77% ± 0.18%, respectivamente) y el SC (40% ± 0.26% y 60% ± 0.18%, respectivamente). Durante la refrigeración se incrementó́ significativamente (p<0.05) la proporción de espermatozoides CA (68% ± 0.27%) y RA (13% ± 0.19%), con respecto al SF; mientras que la congelación redujo significativamente (p<0.05) el porcentaje de espermatozoides NC, con respecto al SR. El Triladyl es un diluyente capaz de criopreservar el semen ovino, a pesar de que no logró evitar la disminución de la viabilidad, la movilidad y el daño de membranas espermáticas. Durante la refrigeración los espermatozoides experimentan el mayor daño, en movilidad, viabilidad y funcionalidad de la membrana plasmática.