Evaluación del efecto citotóxico de los ciclodipéptidos de Pseudomonas aeruginosa PAO1 en muestras de pacientes con leucemia

Abstract

Cancer is one of the main pathologies affecting the population worldwide. The introduction of new strategies for early detection and improvements in cancer therapy have made it possible to reduce its incidence and improve the patients' life quality. This progress has been generated by advances in research into the biological processes that characterize this disease, and these advances will accelerate the introduction of new drugs that improve the management of patients with this pathology. This progress has been generated by advances in research into the biological processes that characterize this disease, and these advances will accelerate the introduction of new drugs that improve the management of patients with this pathology. Cyclo(L-Pro-L-Tyr), cyclo(LPro-L-Phe), cyclo(L-Pro-L-Val), and cyclo(L-Pro-L-Leu) cyclopeptides produced by Pseudomonas aeruginosa PAO1 (PAO1-CDPs), whose effects have been implicated in the inhibition of the proliferation of cancer cell lines. Studies have shown that in the HeLa cancer line, CDPs inhibit the phosphorylation of PI3k/Akt/mTOR signaling pathway proteins via the mTORC1 and mTORC2 complexes, in a manner dependent on the involvement of the TSC1/TSC2 complex. In this work, the effect of these compounds was analyzed in samples of patients with leukemia, in order to continue with preclinical studies and to establish whether CDPs have a cytotoxic effect on these cancer cells through the induction of apoptosis. For the evaluation of cell viability and determination of death type, colorimetric methods and fluorescent staining by flow cytometry, respectively, were used on isolated cells. The results obtained show that CDPs exhibit cytotoxicity on cancer cells with a calculated IC50 of 3.2 μg/mL and a decrease in cell viability of 80% after 4 h of treatment. In addition, through the apoptotic process triggered, 80% of apoptotic cells were obtained after 4 h of treatment. With respect to erythrocytes and platelets, there was no percentage of apoptotic cells after 4 h of treatment.

El cáncer es una de las principales patologías que afectan a la población a nivel mundial. La introducción de nuevas estrategias de detección temprana y mejoras en la terapia del cáncer han permitido disminuir su incidencia y mejorar la calidad de vida de los pacientes. Este progreso ha sido generado por el avance en la investigación de los procesos biológicos que caracterizan esta enfermedad, dichos avances permitirán acelerar la introducción de nuevos fármacos que mejoren el manejo de los pacientes que presentan dicha patología. Los ciclodipéptidos ciclo(L-Pro-L-Tyr), ciclo (LPro-L-Phe), ciclo(L-Pro-L-Val), y ciclo(L-Pro-L-Leu) producidos por Pseudomonas aeruginosa PAO1 (PAO1-CDPs), cuyos efectos han sido implicados en la inhibición de la proliferación de líneas celulares cancerosas. Los estudios han demostrado que en la línea cancerosa HeLa, los CDPs inhiben la fosforilación de las proteínas de la vía de señalización PI3k/Akt/mTOR mediante los complejos mTORC1 y mTORC2, de una manera dependiente de la participación del complejo TSC1/TSC2. En el presente trabajo se analizó el efecto de estos compuestos en muestras directas de pacientes con leucemia, con la finalidad de continuar con los estudios preclínicos y establecer si los CDPs tienen un efecto citotóxico en estas células cancerosas a través de la inducción de la apoptosis. Para la evaluación de la viabilidad celular y determinación de tipo de muerte, se utilizaron métodos colorimétricos y tinciones fluorescentes por citometría de flujo, respectivamente, sobre células aisladas. Los resultados obtenidos demuestran que los CDPs presentan citotoxicidad sobre las células cancerosas con una IC50 calculada de 3.2 μg/mL y disminución de la viabilidad celular del 80% después de 12 h de tratamiento. Además, mediante el proceso apoptótico desencadenado, se logró obtener 80% de células apoptóticas después de 4 h de tratamiento. Con respecto a eritrocitos y plaquetas, no se presentó porcentaje de células apoptóticas después de 4 h de tratamiento.