Estudio del efecto del pH y la fuente de nitrógeno sobre la conidiación en cultivo sumergido de Trichoderma virens TVK1

Abstract

The environment where most of the filamentous fungus developed has conditioned substantially their morphological and metabolic characteristics having the first role over their reproduction type. The normal developed process of the asexual reproduction with the spore formation occurs as the final result of genetic responses to physics and chemists environmental messenges beginning with the spore germination to produce the vegetative filament growth. The Ascomycete fungus Trichoderma virens presents an asexual reproduction through the conidia formation produced by conidiophores not verticilate. Trichoderma virens TVK1, a mutant obtained from the substitution of tvk1 gene in the wild type Trichoderma virens 29.8, presents a conidiation phenotype in submerged culture untypical in the wild type. The tvk1 gene encodes to a kinase of proteins activated by mitogens (MAPk) that take part as a central element in signalization pathways associated with the cellular differentiation and growth. Nutritional factors condiotioned the reproduction in fungus developed, that’s why we studied in this work the concentration and nature of N source over the expression of differentiation phenotype toward the conidia formation in submerged culture by TVK1 mutant of T. virens. Under this standard ammonium (NH4NO3) conditions as N source, the TVK1 strain presented a similar behaviour to the wild type, with a vegetative growth and clamidiospores formation without the real conidas formation. When the concentration was decrease 25 or 50%, the conidiation phenotype was evident. This response was similar when we used NH4Cl.

El ambiente en el que se desarrollan la mayor parte de los hongos filamentosos ha condicionado de forma substancial sus características morfológicas y metabólicas incidiendo así sobre la forma de reproducción. El programa de desarrollo normal de la reproducción asexual a través de la formación de esporas ocurre como el resultado final de la expresión genética en respuesta a mensajes ambientales físicos y químicos, el cual comienza con la germinación de una espora para producir el crecimiento filamentoso vegetativo. El hongo ascomiceto Trichoderma virens presenta una reproducción asexual a través de la formación de conidias producidas a partir de conidióforos no verticilados. Trichoderma virens TVK1, una mutante originada por sustitución del gen tvk1 de la cepa silvestre Trichoderma virens 29.8, presenta un fenotipo de conidiación en cultivo sumergido, atípico en la especie. El gen tvk1 codifica para una cinasa de proteínas activada por mitógenos (MAPk), misma que participa como elemento central en rutas de señalización asociada al crecimiento y a la diferenciación celular. Factores nutricionales son condicionantes en el desarrollo y reproducción de los hongos por lo que en este trabajo se estudió el efecto de la naturaleza y concentración de la fuente de N sobre la expresión del fenotipo de diferenciación hacia la formación de conidias en cultivo sumergido de la mutante TVK1 de T. virens. Bajo condiciones estándar de amonio (NH4NO3) como fuente de N, la cepa TVK1 presentó un comportamiento similar al de la cepa silvestre, esto es, crecimiento vegetativo y formación de clamidosporas sin la formación de conidias verdaderas. Cuando la concentración fue disminuida 25 o 50%, el fenotipo de conidiación se hizo evidente. Esta respuesta fue similar cuando se utilizó NH4Cl.