Purificación y caracterización de lectinas en flores de jamaica Hibiscus sabdariffa L.

Abstract

Hibiscus flower (Hibiscus sabdariffa L), is used in making soft drinks, jellies and teas, as well as for the preparation of jams, ates, jellies, creams and other products. Nutritionally contains vitamin C. In traditional medicine this flower extracts are used to treat various conditions. The pharmacological actions of flower extracts reported include: cholesterol lowering, antioxidant activities, antinociceptive, antipyretic and powerful antihypertensive. The extracts are characterized by low toxicity. The lethal dose for rats orally, is higher than 5000mg / kg. For its nutritional and pharmacological properties reported, the extract is a potential source of therapeutic useful products. Although the extract has been extensively analyzed and is known to contain other components within primarily polysaccharides. To date there are no reports of analysis of lectins. In this paper the identification, purification and characterization of a lectin in the hibiscus is reported. The crude extract presented affinity with the four blood groups, showing lectins with affinity for A1 and A2 groups: GalNAc-Gal-Fuc, for group B: GalNAc-Gal-Fuc, and the group O: Fuc-Gal. With this identification proceeded to purify lectins using a fractional precipitation with ammonium sulfate. The fraction had the highest activity was 60 to 80% ammonium sulfate. This fraction was chosen for further purification by chromatography. First hydrophobic interaction chromatography, followed by gel filtration was used. Purity analysis and obtaining apparent molecular weight was performed by SDS-PAGE electrophoresis under native conditions. A lectin obtained from the flower of Jamaica was called "lectin Hibiscus sabdariffa" (HLS) with the following properties: the apparent molecular weight is 32,500 Da.

La flor de la jamaica (Hibiscus sabdariffa L), se utiliza en la elaboración de bebidas refrescantes, gelatinas e infusiones, así como para la preparación de mermeladas, ates, jaleas, cremas y otros derivados. Nutricionalmente contiene vitamina C. En la medicina tradicional los extractos de esta flor, se utilizan para tratar diversas afecciones. Las acciones farmacológicas de los extractos de la flor reportadas incluyen: disminución de colesterol, actividades antioxidantes, antinociceptivas, antipiréticas y antihipertensivas potentes. Los extractos se caracterizan por tener baja toxicidad. La dosis letal vía oral para ratas, es superior a 5000mg/kg. Por sus propiedades nutricionales y farmacológicas reportadas, el extracto es una fuente potencial de productos útiles terapéuticos. Aunque el extracto ha sido ampliamente analizado y se conoce que dentro de otros componentes contiene principalmente polisacáridos. A la fecha no existen reportes del análisis de lectinas. En este trabajo se reporta la identificación, purificación y caracterización de una lectina en la flor de jamaica. El extracto crudo, presentó afinidad con los cuatro grupos sanguíneos, mostrando lectinas con afinidades para los grupos A1 y A2: GalNAc-Gal-Fuc, para el grupo B: GalNAc-Gal-Fuc, y para el grupo O: Fuc-Gal. Con esta identificación se procedió a purificar a las lectinas utilizando una precipitación fraccionada con sulfato de amonio. La fracción que presentó la mayor actividad fue de 60 a 80% de sulfato de amonio. Esta fracción se escogió para continuar la purificación mediante cromatografías. Primero se utilizó una cromatografía de interacción hidrofóbica, seguida de una de exclusión molecular. El análisis de la pureza así como la obtención del peso molecular aparente se realizó mediante electroforesis SDS-PAGE en condiciones nativas. A la lectina obtenida de la de la flor de la jamaica se le denominó “Lectina de Hibiscus sabdariffa” (HLS) con las siguientes propiedades: el peso molecular aparente es de 32,500 Da.