Distribución de genes mer en bacterias Gram-negativas de origen clínico

Abstract

Mercury (Hg) is a toxic metal for all living beings. Some bacteria have developed resistance mechanisms. The mer bacterial genes conferring resistance by a reduction mechanism of ion Hg2 + to Hg0, which is volatile. The aim of this study was to determine the distribution of mer gene isolated from various regions of Mexico clinical strains. 109 Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa 16 and 6 Acinetobacter baumannii: To do a collection of 131 clinical isolates of Gram negative bacteria was obtained. susceptibility to mercury collection of clinical isolates, strains of which 51 (38.9%) were resistant was determined. In mercury resistant isolates (HgR) detecting genes mer performed by colony hybridization using a gene fragment merA pUM505 P. aeruginosa plasmid as a probe. hybridization signal was detected in 41 of the 51 analyzed strains (80.4%), most of which belong to the species Klebsiella pneumoniae, P. aeruginosa and Acinetobacter. Tests were conducted to determine the pattern of isolated plasmids in HgR and showed presence of mer genes. P. aeruginosa isolates plasmids showed only while Enterobacteriaceae showed one or more plasmids of various sizes (2 to ˃90 kb). Two of the plasmids present in K. pneumoniae isolates were transferred by conjugation from E. coli strains which conferred resistance to mercury. Moreover, two plasmids P. aeruginosa isolates were transferred by transformation PAO1 strain P. aeruginosa. Exconjugantes both transformants and the presence of the mer genes was detected by amplifying the gene by PCR merA.

El mercurio (Hg) es un metal toxico para todos los seres vivos. Algunas bacterias han desarrollado mecanismos de resistencia. Los genes bacterianos mer confieren resistencia por un mecanismo de reducción del ion Hg2+ a Hg0, el cual es volátil. El objetivo de este trabajo es determinar la distribución de genes mer en cepas clínicas aisladas de diversas regiones de la República Mexicana. Para ello se obtuvo una colección de 131 aislados clínicos de bacterias Gram negativas: 109 Enterobacterias, 16 Pseudomonas aeruginosa y 6 Acinetobacter baumannii. Se determinó la susceptibilidad a mercurio en la colección de cepas clínicas, de las cuales 51 cepas (38.9 %) fueron resistentes. En los aislados resistentes a mercurio (HgR) se realizó la detección de los genes mer por hibridación en colonia, utilizando como sonda un fragmento del gen merA del plásmido pUM505 de P. aeruginosa. Se detectó señal de hibridación en 41 cepas de las 51 analizadas (80.4 %), de las cuales la mayoría pertenecen a las especies de Klebsiella pneumoniae, A. baumannii y P. aeruginosa. Se realizaron ensayos para determinar el patrón de plásmidos en los aislados HgR y que mostraron presencia de genes mer. Los aislados de P. aeruginosa presentaron plásmidos únicos mientras que las Enterobacterias mostraron uno o más plásmidos de diversos tamaños (2 a ˃90 kb). Dos de los plásmidos presentes en aislados de K. pneumoniae, se transfirieron por conjugación a cepas de E. coli donde confirieron resistencia a mercurio. Por otra parte, dos plásmidos de aislados de P. aeruginosa se transfirieron por transformación a la cepa P. aeruginosa PAO1. Tanto en las exconjugantes como en las transformantes se detectó la presencia de los genes mer, mediante la amplificación del gen merA por PCR.