Valoración de la estabilidad plasmídica en cepas bacterianas con el método de conservación en suelo modificado estéril

Abstract

Methods of storage at room temperature and easily accessible methodology however you run the risk that microorganisms grow and spontaneously change their genetic characteristics (mutation, plasmid loss, etc.). The method of preservation in "sterile soil amended" at room temperature proved to be a very good option for the preservation of various bacterial genera as it meets the primary purpose of any conventional method of conservation. Antimicrobial susceptibility testing 16 bacterial strains were performed before and after 32 months of conservation "modified sterile soil." To validate resistance plasmids preserving plasmid DNA extraction by means of alkaline lysis was performed after preservation besides these were analyzed by RFLP with restriction enzymes Hind III and EcoR I. Obtaining a basis for comparison in the preservation of antibiotic resistance plasmids before and after preservation with this method. The results obtained show us a 51% preservation of the plasmids in Gram positive strains and 100% preservation Gram negative strains. Previous studies have shown that the methods of storage at room temperature are unsuitable if required to maintain stable and viable microorganisms for a long period of time.

Los métodos de conservación a temperatura ambiente son accesibles y de fácil metodología sin embargo se corre el riesgo que los microorganismos crezcan y espontáneamente cambian sus características genéticas (mutación, pérdida de plásmidos, etc.). El método de conservación en “suelo modificado estéril” a temperatura ambiente ha demostrado ser una muy buena opción para la preservación para diversos géneros bacterianos ya que cumple el propósito primordial de cualquier método de conservación convencional. Se realizaron pruebas de susceptibilidad a antimicrobianos 16 cepas bacterianas antes y después de 32 meses de la conservación en “suelo modificado estéril”. Para validar la preservación de plásmidos de resistencia se realizo una extracción de DNA plasmídico por medio de lisis alcalina después de la conservación además estos se analizaron mediante RFLP con las enzimas de restricción Hind III y EcoR I. Obteniendo una base de comparación en la conservación de plásmidos de resistencia a antimicrobianos antes y después de la preservación con este método. Los resultados obtenidos nos demuestran una conservación del 51% de los plásmidos en las cepas Gram positivas y una preservación del 100% en las cepas Gram negativas. En estudios anteriores se ha demostrado que los métodos de conservación a temperatura ambiente no son adecuados si se requiere mantener estable y viable a los microorganismos por un largo periodo de tiempo.