Análisis de la expresión de los genes glucosa oxidasa de la cepa Ed8 de Apergillus niger var. Tubingensis

Abstract

Glucose oxidase (GOX ) in an enzyme belonging to the family of oxidoreductases , which is widely used industrially , this being important for the preservation of foods , in addition to being a key to the determination of glucose in biological fluids reagent. Described secretable GOX activity in certain species of Aspergillus sp. and Penicillium sp. Our working group isolated a strain of Aspergillus niger environmental var. tubingensis called ID8 , which shows an activity level of higher GOX secretable regarding collection strains for which the strain is ED8 great biotechnological interest due to the possible capacity as hiperproductora GOX enzyme . In addition , cloned and sequenced a gene with secretable GOX activity of strain ed8 called goxC . In an exhaustive search goxC homologs in the genome of A. niger , three other genes with high identity were located by goxC in a range of 26-54 %, with gox2 which showed greater identity with goxC . The aim of our study was to determine both the transcript levels and gox2 goxC ED8 gene in strain as well as the comparison of these levels of expression of both genes with reference strains, which were grown in different concentrations of glucose at different times development . The amount of transcript in which the A732 strain shows higher expression levels to be quantified ed8 strain , and it was observed that the amount of transcript was related to the glucose concentration and the time . GoxC promoters and genes gox2 ED8 , 593 and A732 strain for Differences and seek a possible explanation in the regulation of GOX were cloned .

La glucosa oxidasa (GOX) en una enzima perteneciente a la familia de las oxidorreductasas, la cual es muy utilizada industrialmente, siendo esta importante para la conservación de alimentos, además de ser un reactivo fundamental en la determinación de glucosa en fluidos biológicos. Se ha descrito la actividad de GOX secretable en ciertas especies de Aspergillus sp. y de Penicillium sp. Nuestro grupo de trabajo aisló una cepa ambiental de Aspergillus niger var. tubingensis denominada Ed8, la cual muestra un nivel de actividad de GOX secretable más alta con respecto a cepas de colección, por lo cual, la cepa Ed8 es de gran interés biotecnológico, debido a la posible capacidad como hiperproductora de la enzima GOX. Además, se clonó y secuenció un gen con actividad de GOX secretable de la cepa Ed8, denominado goxC. En una búsqueda exhaustiva de homólogos de goxC en el genoma de A. niger, se ubicaron otros tres genes con alta identidad por goxC en un rango de 26 a 54%, siendo gox2 el que mostro mayor identidad con goxC. El objetivo de nuestro trabajo fue conocer niveles de transcrito tanto el gen goxC y gox2 en la cepa Ed8, así como la comparación de dichos niveles de expresión de ambos genes con cepas de referencia, las cuales fueron crecidas en diferentes concentraciones de glucosa a diferentes tiempos de desarrollo. Se cuantificó la cantidad de transcrito en donde la cepa A732 muestra niveles de expresión mayores a la cepa Ed8, y se observó que la cantidad de transcrito estaba relacionado con la concentración de glucosa y el tiempo. Se clonaron los promotores de los genes goxC y gox2 de la cepa Ed8, 593 y A732 para buscar diferencias y buscar una posible explicación en la regulación de GOX.