Selección e identificación de un aislado fúngico con notable actividad pectinolítica

Abstract

Pectinases have various industrial applications which has intensified the search for bodies with a significant production of these enzymes. In particular, filamentous fungi known for their ability to produce extracellular enzymes, which is why the importance of studies of enzymatic diversity of this group of microorganisms. The aim of this study was to select a fungal isolate with remarkable pectinolytic activity. 103 fungi isolated from three different ecosystems (fruit, vegetable and forest) were propagated in basal medium supplemented with 1% pectin (w/v), the plates were stained with a solution of hexadecyl trimethyl ammonium 1% (w/v), the area of the degraded pectin is noted as a transparent area, the pectinolytic index (IP) was calculated by dividing the diameter of pectin degradation between the diameter of colony growth. A correspondence analysis was performed to determine the distribution of the 20 fungal isolates with the highest IP, depending on the growth (CREC), ecosystem (ECO) and IP. The extracellular pectinolytic activity was recorded every 24 hours for 14 days in liquid fermentation. The amount of reducing sugars released was measured by the DNS method. 98% of the isolates had an IP ? 1.0. The isolated 47 was selected because it had the maximum value of IP and had moderate growth relative to the rest of the fungal isolates, which were identified by molecular techniques. Based on the correspondence analysis, a group of fungi obtained from vegetables showed a high degradation pattern compared to IP. The results of the sequencing of the ITS region showed that the isolated 47 Fusarium solani is a 100 % identity, accession number JQ910159.1 (MegaBLAST, NCBI). Maximum pectinolytic activity (0.14 mU/ mg) was observed at 72 h of the time course of the fermentation.

Las pectinasas tienen diversas aplicaciones industriales por lo que se ha intensificado la búsqueda de organismos con una producción significativa de estas enzimas. En particular, los hongos filamentosos destacan por su capacidad para producir enzimas extracelulares, es por ello la importancia de estudios de diversidad enzimática de este grupo de microorganismos. El objetivo de este trabajo fue seleccionar un aislado fúngico con notable actividad pectinolítica. 103 hongos aislados de tres ecosistemas diferentes (frutícola, hortícola y boscoso) se propagaron en medio basal enriquecido con pectina al 1 % (w/v), las placas se tiñeron con una solución de hexadecil trimetil amonio al 1 % (w/v), el área de la pectina degradada se observó como una zona transparente, el índice pectinolítico (IP) se determinó al dividir el diámetro de degradación de la pectina entre el diámetro de crecimiento de las colonias. Un análisis de correspondencia se realizó para conocer la distribución de los 20 aislados fúngicos con el mayor IP, en función del crecimiento (CREC), ecosistema (ECO) e IP. La actividad pectinolítica extracelular se registró cada 24 horas durante 14 días en medios de fermentación líquida. La cantidad de azúcares reductores liberados se midió por el método de DNS. El 98 % de los aislados tuvo un IP ≥ 1.0. El aislado 47 se seleccionó ya que tuvo el máximo valor de IP y presentó un crecimiento moderado en relación al resto de los aislados fúngicos, el cual se identificó por técnicas moleculares. En base al análisis de correspondencia, un grupo de hongos obtenidos de hortalizas mostró un elevado patrón de degradación respecto al IP. Los resultados de la secuenciación de la región ITS demostraron que el aislado 47 es Fusarium solani con un 100 % de identidad, número de acceso JQ910159.1 (MegaBLAST, NCBI). La máxima actividad pectinolítica (0.14 mU/mg) se observó a las 72 h del curso temporal de la fermentación.