Estudio de la incidencia de anormalidades cromosómicas y mutaciones en los genes N-Ras y K-Ras asociados a mieloma múltiple

Abstract

Multiple Myeloma (MM) is a malignant neoplasm oh plasma cells with uncertain etiopathogenesis that invades de bone marrow results in a great skeletal destruction, sip al insufficiency and complications. Its general biological characteristics include alterations of hematopoiesis that can be accompanied of molecular, immunological and/or cytogenetic alterations. Multiple Myeloma represents the 1% of all the types of cancer and approximately the 10% of all malignant hematological entities. Among the most commonly used methologies for its study, in situ hybridization with fluorescent probes (FISH) it´s found for the identification of MLL, ATM and p53 genes abnormalities. Likewise, mutations have been described at the molecular level related to RAS pronto-oncogene that Is constituted by three members; H, N y K RAS, proteins with guanosine triphosphatase activity (GTPase), the mutations of the K-RAS and N-RAS genes are involved in a 10 to 40% in patines with MM at the time of diagnosis and in a 40 to 70% at the time of relapse rising to a bad prognosis in both cases, with a study methodology based in the PCR amplification (polymerase chain reaction) and subsequent sequencing of exons 1 and 2, where most of the mutations are present in codons 12, 13 y 61 of both genes. In the present dissertation a retrospective analysis of the chromosomal alterations has been made in patients with presumptive diagnosis of Multiple Myeloma by means of methodologies as classical cytogenetic by conventional karyotype, analyzing a total of 237 samples and finding structural and / or numerical mutations in 26.60% of the total of samples analyzed where the highest frequency of alterations found were hyperdiploid karyotypes (43.8%) in which the most affected chromosomes correspond to 9, 11, 13 and 21. Besides, the analysis of 11 samples without previous isolation of plasma cells and 22 with previous isolation of plasma cells to be analyzed by fluorescent in situ hybridization FISH with previously mentioned probes.

El mieloma múltiple (MM) es una neoplasia maligna de células plasmáticas con etiopatogénesis incierta que invade la medula ósea produciendo una gran destrucción esquelética, insuficiencia medular y complicaciones. Sus características biológicas generales incluyen alteraciones de la hematopoyesis, que pueden ir acompañadas por alteraciones moleculares, inmunológicas y/o citogenéticas. El MM representa el 1% de todos los tipos de cáncer y aproximadamente el 10% de todas las entidades malignas hematológicas. Entre las metodologías más utilizadas para su estudio se encuentra la hibridación in situ con sondas fluorescentes (FISH) para la identificación de anormalidades de los genes MLL, ATM y p53. Así mismo se han descrito mutaciones a nivel molecular relacionadas con el pronto-oncogén RAS el cual está constituido por tres miembros H, N y K RAS, proteínas con actividad guanosin trifosfatasa (GTPasa). Las mutaciones de los genes K-Ras y N-Ras se ven involucradas en un 10 al 40% en pacientes con MM al momento de su diagnóstico y del 40 al 70% en el momento de la recaída, asociándose a un mal pronóstico en ambos casos. En el presente trabajo se realizó un análisis retrospectivo de las alteraciones cromosómicas encontradas en pacientes con diagnóstico presuntivo de mieloma múltiple mediante metodologías como citogenética clásica por cariotipo convencional, analizándose un total de 237 muestras y encontrándose mutaciones estructurales y/o numéricas en un 26.60% del total de las muestras analizadas, en donde la mayor frecuencia de alteraciones encontradas fueron los cariotipos hiperdiploides (43.8%) en donde los cromosomas más afectados corresponden al 9, 11, 13 y 21. Por otra parte se incluyó el análisis de 11 muestras sin previo aislamiento de células plasmáticas y 22 con previo aislamiento de células plasmáticas para ser analizadas por hibridación in situ fluorescente FISH con las sondas anteriormente mencionadas.