Caracterización de cepas de Trichoderma spp. aisladas de un cultivo de sorgo

Abstract

In the present work, molecular identification was carried out, as well as the evaluation of physiological and biochemical characteristics of 12 fungal species of Trichoderma from three different compartments of a sorghum agroecosystem. Mycelial growth was analyzed by growth kinetics, as well as the capacity for conidiation and germination of conidia, in addition, the production of extracellular hydrolytic enzymes was evaluated. Growth kinetics performed at three different temperatures showed that the study strains grow and conidia optimally at 28ºC in Potato Dextrose Agar (PDA) medium than in Malt Extract Agar (MEA) medium. Trichoderma strains from the rhizosphere grew and germinated better at extreme temperatures of 16ºC and 36ºC than the endophytic strains from foliar and root tissue. In general, the study strains germinated better on AEM than on PDA. For the germination tests, the strains that presented the best conidiation levels were selected. The strains T4RB and T2HF isolated from root and foliar tissue, respectively, showed the percentages of germination. The T2HF strain showed 98% germination in the PDA medium and 91.3% in AEM, while the T4RB strain showed 80% germination in both culture media. Soil strains showed significant variation in germination capacity. When evaluating the extracellular hydrolytic enzymatic activity, a better production was presented in strains from the soil. Phylogenetic analysis using the ITS region and the partial sequence of the 1α gene (tef1) distributed the study strains into different terminal groups. The T4RB strain is related to T. atroviride; strains 3T9G and 3T17G were associated with T. virens sequences, while strains 2T21G, 2T6G, and 2T22G were grouped with strains of the T. afroharzianum species.

En el presente trabajo se realizó la identificación molecular, así como la evaluación de características fisiológicas y bioquímicas de 12 especies fúngicas de Trichoderma provenientes de tres compartimentos diferentes de un agroecosistema de sorgo. Se analizó el crecimiento micelial mediante cinéticas de crecimiento, así como la capacidad de conidiación y germinación de conidias, además se evaluó la producción de enzimas hidrolíticas extracelulares. Las cinéticas de crecimiento realizadas en tres diferentes temperaturas, demostraron que las cepas de estudio crecen y conidian óptimamente a 28ºC en medio Agar Papa Dextrosa (PDA) que en medio Agar Extracto de Malta (AEM). Las cepas de Trichoderma de rizósfera crecieron y germinaron mejor a temperaturas extremas de 16ºC y 36ºC que las cepas endófitas de tejido foliar y de raíz. En general, las cepas de estudio germinaron mejor en AEM que en PDA. Para los ensayos de germinación se seleccionaron las cepas que presentaron los mejores niveles de conidiación. Las cepas T4RB y T2HF aisladas de raíz y tejido foliar respectivamente, mostraron los porcentajes de germinación. La cepa T2HF presentó un 98% de germinación en medio PDA y 91.3% en AEM, mientras que la cepa T4RB presentó un 80% en germinación en ambos medios de cultivo. Las cepas de suelo mostraron una variación significativa en la capacidad de germinación. Al evaluarse la actividad enzimática hidrolítica extracelular se presentó una mejor producción en cepas provenientes de suelo. El análisis filogenético empleando la región ITS y la secuencia parcial del gen 1α (tef1) distribuyó a las cepas de estudio en distintos grupos terminales. La cepa T4RB está relacionada con T. atroviride; las cepas 3T9G y 3T17G se asociaron con secuencias de T. virens, mientras que las cepas 2T21G, 2T6G y 2T22G se agruparon junto con cepas de la especie T. afroharzianum.