Evaluación de la inmunogenicidad de un candidato vacunal multiepitópico derivado de la proteína GP5 del virus PRRS

Abstract

The disease caused by the porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) is the leading cause of economic losses in the swine industry worldwide. Available commercial vaccines present deficiencies in aspects of safety, cross- protection, and effectiveness in inducing cellular and humoral responses, thus diminishing their protective capacity. Therefore, research into new vaccine candidates to prevent this disease is relevant. Our group has studied the immunogenic properties of four synthetic peptides derived from the PRRSV GP5 protein, which possess T and B epitopes, called GP5-T, GP5-T3, GP5-B, and GP5-B3. Previously, in piglets, we demonstrated that both GP5T and GP5T3 induced the activation of the cytolytic cellular response mediated by cytotoxic T lymphocytes (CTLs). Likewise, both GP5-B and BP5- B3 induced the secretion of immunoglobulin G (IgG) associated with neutralizing antibodies and promoted the activation of antibody-secreting plasma B lymphocytes. In this study, we evaluated the immunogenicity of a formulation we called Tetra-Pep- GO, composed of the four GP5 peptides previously described, linked to a carrier protein and two adjuvants. A murine model was used with an intradermal immunization schedule and a booster at 21 days post-immunization (dpi). The serum concentration of total IgG and the number of CD4+ helper T lymphocytes (HTL) and differentiated and activated CD8+ helper T lymphocytes (HTC) (CD44+) were evaluated. Tetra-Pep- GO induced an increase in total IgG at 21, 42, and 80 dpi. Likewise, at 80 dpi, activation of the ThL population (CD4+/CD44+) and a significant increase in the cLT population (CD8+/CD44-) were observed. Overall, the data generated suggest long-term immunogenicity induced by Tetra-Pep-GO.

La enfermedad causada por el virus del síndrome reproductivo y respiratorio porcino (PRRSV), es la principal causa de pérdidas económica en la industria porcina en el mundo. Las vacunas comerciales disponibles presentan deficiencias en aspectos de seguridad, protección cruzada y efectividad en la inducción de la respuesta celular y humoral, disminuyendo así su capacidad de protección. Por lo tanto, es relevante la investigación de nuevos candidatos vacunales para prevenir esta enfermedad. En nuestro grupo se han estudiado las propiedades inmunogénicas de cuatro péptidos sintéticos, derivados de la proteína GP5 del PRRSV, los cuales poseen epítopos T (- T) y B (-B), denominados: GP5-T, GP5-T3, GP5-B y GP5-B3. Previamente, en lechones demostramos que, tanto GP5T como GP5T3, indujeron la activación de la respuesta celular citolítica mediada por Linfocitos T citotóxicos (LTc). Asimismo, tanto GP5-B como BP5-B3, indujeron la secreción de inmunoglobulinas G (IgG’s) asociadas a anticuerpos neutralizantes y favorecieron la activación de Linfocitos B plasmáticos secretores de anticuerpos. En este trabajo se evaluó la inmunogenicidad de una formulación a la que denominamos Tetra-Pep-GO, compuesta por los cuatro péptidos de GP5 previamente descritos, unidos a una proteína acarreadora y dos adyuvantes. Se empleó un modelo murino con un esquema de inmunización intradérmica y un refuerzo a los 21 días pos-inmunización (dpi). Se evaluó la concentración sérica de IgG´s totales y la cantidad de linfocitos T cooperadores (LTh) CD4+ y LTc, CD8+ diferenciados y activados (CD44+). Tetra-Pep-GO indujo un aumento de IgG´s totales a los 21, 42 y 80 dpi. Así mismo, a los 80 dpi se observó la activación de la población de LTh (CD4+/CD44+) y el aumento significativo de la población de LTc (CD8+/CD44-). En conjunto los datos generados sugieren inmunogenicidad a largo plazo inducida por Tetra-Pep-GO.