Análisis de la respuesta de los linfocitos T a la infección por Circovirus porcino tipo 2

Abstract

Porcine Circovirus type 2 has been associated with diseases that cause in pigs growth failure and respiratory problems. One of the evasion mechanisms of the immune response is that PCV2 can remain in the pig tonsils and remerge after years. T lymphocytes (CD4+) are target cells of PCV2 that can contribute to the maintenance of viremia. The differentiation of the CD4+ cells toward Th1 phenotype depends on the expression or repression of the T-bet transcription factor, which directly regulates IFNγ expression. At present, are unknown the mechanisms of subversion of the immune response that facilitate the persistence of PCV2 during different stages of development in PCV2+ infected animals. The objective of the present work was: Analyze the relation between T-bet and IFNγ in CD4+ cells obtained by positive selection from PCV2 + and PCV2- (Control) animals, both groups was divided into three clusters: maternal weaning (DMT), Initiation (INI) and growth (CRE). In addition, PCV2 cells infected were evaluated and the state of health too by the measurement of the total monocytes and lymphocytes. METODS: serum and blood were obtained from 48 pigs of both groups, PCV2+ (Michoacán) and PCV2- (Guanajuato). Mononuclear populations were analyzed and immunodetection of PCV2 was performed by flow cytometry. Quantitative PCR was performed to measure the expression of T-bet, GATA3, IFNγ, IL-4 and IL-10. RESULTS: The number of PCV2 + cells was lower in DMT, and increased in INI and CRE. Cell populations indicated that the number of macrophages increased in all three stages and the number of lymphocytes in DMT and INI were maintained, compared to control animals. Which suggests that PCV2+ animals in the DMT and INI stage could have a better antiviral response compared to CRE.

El Circovirus porcino tipo 2 (PCV2), está asociado a diversas enfermedades que cursan con retraso en el crecimiento y problemas respiratorios en cerdos. Como parte de los mecanismos de evasión de la respuesta inmune, PCV2 puede permanecer en tonsilas en cerdos y reemerger años después. Las células blanco incluyen a los linfocitos T (CD4+), los cuales podrían contribuir al mantenimiento de la viremia. La diferenciación del linfocito CD4+ hacía en fenotipo Th1 depende de la expresión/represión del factor de transcripción T-bet, el cual regula directamente la expresión de IFNγ. Hasta el momento no se conocen los mecanismos de subversión de la respuesta inmune que facilitan la persistencia del PCV2 durante diferentes etapas de desarrollo en animales PCV2+ infectados. OBJETIVO: Analizar la relación entre la expresión de T-bet e IFNγ en células CD4+ obtenidas por selección positiva a partir de animales PCV2+ y PCV2- (Control), en los grupos experimentales: destete (DMT), Iniciación (INI) y crecimiento (CRE). Además, evaluar las células positivas al virus PCV2+ y determinar el estado de salud del animal a través de la medición de monocitos y linfocitos totales. MÉTODOS: Se obtuvo suero y sangre total de 48 individuos. Granja PCV2+ (Michoacán), granja PCV2- (Guanajuato). Se cuantificaron las poblaciones de células mononucleares y se realizó la inmunodetección de PCV2 por citometría de flujo. Mediante PCR cuantitativa se midió la expresión de T-bet, GATA3, IFNγ, IL-4 y IL-10. RESULTADOS: El número de células PCV2+, fue menor en DMT, y aumentó en INI y CRE. Las poblaciones celulares indican que aumentó el número de monocitos en las tres etapas y se mantiene el número de linfocitos en DMT e INI, comparado con los animales control. Lo cual sugiere que los animales PCV2+ en la etapa DMT e INI, podrían tener una mejor respuesta antiviral comparada con CRE.