Efecto antifúngico de un recubrimiento de quitosano con extracto acuoso de tallo de Verbesina sphaerocephala sobre Botrytis cinerea en frutos de zarzamora

Abstract

The in vitro and in vivo antifungal activity of the aqueous extract of Verbesina sphaerocephala stem (EATVs) combined with chitosan was evaluated for the control of Botrytis cinerea in blackberry fruits (Rubus fruticosus cv. Tupy). The EATVs was obtained by infusion (90 °C) and maceration in water:ethanol (1:1, v/v) and for the determination of its antifungal effect, in vitro assays were performed with the well diffusion method testing concentrations of (0-0.9 mg/mL) of the EATVs and chitosan (1-3%). In the in vivo phase, blackberry fruits were disinfected and inoculated with a suspension of spores (1x103 spores/mL) of B. cinerea. The fruits were coated by immersion (5 min) and stored in cold (10 °C/7 days) and in shelf-life simulation (25 °C/5 days) to determine the severity index (SI). By in vitro assays, the calculated Total Lethal Concentration (IC100) of the EATVs was 1.01 mg/mL, while chitosan at 2.5% reached 88% inhibition. However, with the combination of both (IC100 of EATVs + 2.5% chitosan) a total inhibition (100%) of mycelial growth was achieved. In the fruit trials, this same combined coating showed 100% efficacy, eliminating symptoms of B. cinerea infection during the evaluation period at 25 °C (IS=0). With the addition of the aqueous extract of the stem of V. sphaerocephala, the antifungal properties of chitosan were enhanced. This synergistic formulation is a viable alternative to prolong the shelf-life of blackberries, maintaining fruit quality and offering comprehensive protection against grey mould.

Se evaluó la actividad antifúngica in vitro e in vivo del extracto acuoso de tallo de Verbesina sphaerocephala (EATVs) combinado con quitosano para el control de Botrytis cinerea en frutos de zarzamora (Rubus fruticosus cv. Tupy). El EATVs se obtuvo mediante infusión (90 °C) y maceración en agua:etanol (1:1, v/v) y para la determinación de su efecto antifúngico, se realizaron ensayos in vitro con el método de difusión en pozo probando concentraciones de (0-0.9 mg/mL) del EATVs y de quitosano (1-3%). En la fase in vivo, se utilizaron frutos de zarzamora desinfectados e inoculados con una suspensión de esporas (1x103 esporas/mL) de B. cinerea. Los frutos fueron recubiertos por inmersión (5 min) y almacenados en frío (10 °C/7 días) y en simulación de vida de anaquel (25 °C/5 días) para determinar el índice de severidad (IS). Mediante los ensayos in vitro, la Concentración Letal Total (CI100) calculada del EATVs fue de 1.01 mg/mL, mientras que el quitosano al 2.5% alcanzó un 88% de inhibición. No obstante, con la combinación de ambos (CI100 de EATVs + 2.5% quitosano) se logró una inhibición total (100%) del crecimiento micelial. En las pruebas con frutos, este mismo recubrimiento combinado mostró un 100% de eficacia, eliminando los síntomas de infección por B. cinerea durante el periodo de evaluación a 25 °C. Con la adición del extracto acuoso de tallo de V. sphaerocephala, se potenciaron las propiedades antifúngicas del quitosano. Esta formulación sinérgica constituye una alternativa viable para prolongar la vida de anaquel de la zarzamora, manteniendo la calidad del fruto y ofreciendo una protección integral contra el moho gris.