Actividad antifúngica del aceite esencial de tres especies de Tagetes sobre Neopestalotiopsis sp., hongo causante de la mancha foliar y pudrición en fresa

Abstract

The antifungal activity of the essential oil of three species of Tagetes (T. lucida, T. lunulata and T. micrantha) was evaluated on Neopestalotiopsis sp., causal fungus of brown rot of the inner crown and root in strawberry plants, so, in a first phase of the investigation, the isolation, identification and molecular characterization of this phytopathogenic fungus was carried out. From root and crown segments of strawberry plants (Fragaria x ananassa) Cv. Albion previously disinfected, 40 preliminary isolates were obtained in Potato Dextrose Agar (PDA) medium of which one of them showed a morphological coincidence typical macro and microscopically of the genus Neopestalotiopis, since it presented cottony white mycelium with wave growth, with a light yellow color on the reverse side of the colony, presenting conidiomas with three hyaline apical appendages, black on the mycelium and containing macroconidia with five cells where the basal and apical are hyaline and the three middle cells of different brown tones. Identification was performed by amplification and sequencing of two ITS genetic regions (ITS1, ITS4) and BLAST analysis obtained a 100% identity with N. clavispora in the NCBI GenBank. The pathogenicity was verified with the inoculation of spores (1x103 spores/mL) in the center of the crown in whole plants in strawberry plants (Fragaria x ananassa Cv. Aromas) in vitro, since the symptoms of the disease were presented as spots on the edges of the leaves of brown-oxide color and principles of necrosis in the crown and roots. For the determination of the antifungal effect of the essential oil of the three species of Tagetes under study, these were obtained by hydrodistillation in a Clevenger type equipment, from the aerial part (stems, leaves and flowers).

La actividad antifúngica del aceite esencial de tres especies de Tagetes (T. lucida, T. lunulata y T. micrantha) fue evaluada sobre Neopestalotiopsis sp. hongo causal de pudrición parda de la corona interna y la raíz en plantas de fresa, por lo que, en una primera fase de la investigación, se realizó el aislamiento, identificación y caracterización molecular de este hongo fitopatógeno. De segmentos de raíz y corona de plantas de fresa (Fragaria x ananassa) Cv. Albión previamente desinfectados, se obtuvieron 40 aislados preliminares en medio Papa Dextrosa Agar (PDA) de los cuales uno de ellos mostró una coincidencia morfológica típica macro y microscópicamente del género Neopestalotiopis, ya que presentó micelio de color blanco algodonoso con crecimiento ondulatorio, con un color amarillo claro al reverso de la colonia, presentando conidiomas con tres apéndices apicales hialinos, de color negro sobre el micelio y conteniendo macroconidios con cinco celdas donde la basal y la apical son hialinas y las tres celdas medias de diferentes tonos de café. La identificación se realizó mediante la amplificación y secuenciación de dos regiones genéticas ITS (ITS1, ITS4) y mediante el análisis BLAST se obtuvo una identidad del 100 % con N. clavispora en el NCBI GenBank. La patogenicidad fue comprobada con la inoculación de esporas (1x103 esporas/mL) en el centro de la corona en plantas completas en plantas de fresa (Fragaria x ananassa Cv. Aromas) in vitro, ya que se presentaron los síntomas de la enfermedad como manchas en los bordes de las hojas de color café-óxido y principios de necrosis en la corona y raíces. Para la determinación del efecto antifúngico del aceite esencial de las tres especies de Tagetes en estudio, estos se obtuvieron mediante hidrodestilación en un equipo tipo Clevenger, a partir de la parte aérea (tallos, hojas y flores).