Efecto del ácido alfa-linolénico en el metabolismo energético mitocondrial de Saccharomyces cerevisiae durante el envejecimiento cronológico

Abstract

To investigate the changes that occur in the mitochondrial functionality during cellular aging, various parameters of mitochondrial function such as measuring levels of lipid peroxidation, the mitochondrial membrane potential, activity F0F1 ATPase, during aging were evaluated chronological native cells (C18: 3) in S. cerevisiae and cells whose membranes were enriched with α-linolenic acid (C18 + 3). And the analysis of mitochondrial fatty acid composition and pH measurement of different media. The fatty acid analysis showed that the α-linolenic acid is converted in the main fatty acid component of the mitochondrial membrane, showing these further acidification of the culture medium, which has been considered a marker of aging in yeast. In crops 28 days not lipid peroxidation was observed showing resistance to this parameter in the presence of C18: 3 by modification of Buege and Aust reported by method. While measuring the early stages (initiation) of lipoperoxidation by oxygen consumption, was more decreased while aging were the cell. ATP hydrolysis by F1FO ATPase is diminished as more aged mitochondria be without differences in the presence or absence of α- linolenic acid. The results of measuring mitochondrial membrane potential in the presence of glucose were nulls in the C18 cells + 3, whereas in cells C18: 3 of 28 days, if this parameter is detected. Together these data show that the incorporation of C18: 3 increases the rate of chronological aging of S. cerevisiae parallel to a decrease in mitochondrial function due to loss of membrane potential way.

Para investigar los cambios que suceden en la funcionalidad mitocondrial durante el envejecimiento celular, se evaluaron distintos parámetros de la función mitocondrial como lo son la medición de los niveles de lipoperoxidación, el potencial de membrana mitocondrial, la actividad de la F0F1 ATPasa, durante el envejecimiento cronológico de células nativas (-C18:3) de S. cerevisiae y en células cuyas membranas fueron enriquecidas con ácido α-linolénico (+C18:3). Así como el análisis de la composición de ácidos grasos mitocondriales y la medición del pH de los distintos medios. El análisis de ácidos grasos mostro que el ácido α-linolénico se convierte en el principal componente de ácidos grasos de la membrana mitocondrial, mostrando estos una mayor acidificación del medio de cultivo, lo cual ha sido considerado un marcador de envejecimiento en levaduras. En los cultivos de 28 días no se observó peroxidación lipídica mostrando una resistencia a este parámetro en presencia de C18:3 por la modificación del método reportado por Buege y Aust. Mientras que al medir las primeras etapas (iniciación) de la lipoperoxidación por consumo de oxígeno, se vio una disminución mientras más envejecida estuviese la célula. La hidrólisis del ATP por la F1FO ATPasa, se ve disminuida conforme más envejecida se encuentre la mitocondria sin haber diferencias en presencia o ausencia del ácido α- linolénico. Los resultados de la medición de potencial de membrana mitocondrial en presencia de glucosa fueron nulos en las células +C18:3, mientras que en las células –C18:3 de 28 días, si se detectó este parámetro. En conjunto, estos datos muestran que la incorporación del C18:3 aumenta la tasa de envejecimiento cronológico de S. cerevisiae de manera paralela a una disminución en la funcionalidad mitocondrial atribuible a la pérdida del potencial de membrana.