Aplicación de técnicas moleculares para la detección de polimorfismos de la monoamino oxidasa en grupos de control

Abstract

Monoamine oxidases A and the B (MAOA and MAOA) oxidoreductases are enzymes that catalyze type oxidative deamination of monoamines such as monoamine neurotramisores. The genes encoding MAOA and MAOB respectively have the same name and are located on chromosome X p11.23. It has been reported that uVNTR MAOA and A644G MAOB polymorphisms confer a difference of transcriptional activity, these genetic variants MAOs has been associated with disorders psychiatric character and neurodegenerative diseases such as depression, Parkinson, Alzheimer, schizophrenia, attention deficit and hyperactivity disorder among others. Thus the correct genotyping of affected populations and control allows to establish the correlation between the polymorphic variant, the severity and type of disease. In this paper allelic variants and MAOB A644G uVNTR MAOA they were determined in a population of control subjects (unaffected) using molecular methods based on PCR (polymerase chain reaction). The study population had 102 individuals, 48 ​​women and 54 men. Each of the individuals a sample from the buccal cheek cells for extraction of genomic DNA was obtained. Each of the samples was analyzed for polymorphism MAOA uVNTR through PCR amplification of the polymorphic region. The frequency of possible alleles (2, 3, 3.5, 4 and 5) in the study population was 3> 4 for women, while for men a frequency of 4> 3 was obtained. Finally and in order to determine the A644G SNP MAOB, a test based on allele specific PCR for amplification of this polymorphism was designed, generating an alternative to RFLP technique (restriction fragment polymorphism lenght) reported.

Las Monoamino Oxidasas A y B (MAOA y MAOB) son enzimas del tipo oxidoreductasas que catalizan la desaminación oxidativa de las monoaminas como pueden ser monoamino-neurotramisores. Los genes que codifican para MAOA y MAOB reciben el mismo nombre respectivamente y están localizados en el cromosoma X p11.23. Ha sido reportado que los polimorfismos uVNTR de MAOA y A644G de MAOB confieren una diferencia de actividad transcripcional, estas variantes genéticas de las MAOs se ha relacionado con trastornos del carácter psiquiátrico y enfermedades neurodegenerativas como depresión, Parkinson, Alzheimer, esquizofrenia, déficit de atención y desorden de hiperactividad entre otras. Así, la correcta genotipificación de poblaciones afectadas y control permite establecer la correlación existente entre la variante polimórfica, la severidad y tipo de enfermedad. En el presente trabajo se determinaron las variantes alélicas MAOA uVNTR y MAOB A644G en una población de individuos control (no afectados) utilizando metodologías moleculares basadas en PCR (polymerase chain reaction). La población estudiada contó con 102 individuos, 48 mujeres y 54 hombres. De cada uno de los individuos se obtuvo una muestra procedente de células del carrillo bucal para la extracción de DNA genómico. Cada una de las muestras fue analizada para el polimorfismo MAOA uVNTR a través de la amplificación por PCR de la región polimórfica. La frecuencia de los alelos posibles (2, 3, 3.5, 4 y 5) en la población estudiada fue de 3 > 4 para mujeres, mientras que para hombres se obtuvo una frecuencia de 4 > 3. Finalmente y con el fin de determinar el SNP A644G de MAOB, se diseñó una prueba basada en PCR para la amplificación alelo específica de los portadores de este polimorfismo, generando una alternativa a la técnica RFLP (restriction fragment lenght polymorphism) reportada.