Análisis proteómico de células endoteliales de bovino infectadas con Staphylococcus aureus

Abstract

The endothelium is a monolayer of cells that line the inside of blood vessels, this is between blood and tissues, fulfills multiple fundamental biological functions. On the other hand, this type of cells can be infected by a series of Gram-positive bacteria such as Staphylococcus aureus. This bacterium can be responsible for a wide range of diseases ranging from infections in the skin and soft tissues to serious infections that can be lifethreatening. Its form of dissemination depends largely on particular virulence characteristics, resistance against a wide variety of antibiotics and the protein / protein interaction that occurs within the host cell. The present study was carried out with the objective of knowing the response at the proteomic level of bovine umbilical cord endothelial cells (CEB) in interaction with S. aureus. The hypothesis was that the physiology of the BECs is modified when they establish an interaction with S. aureus, causing a change in their protein profiles. This hypothesis was tested using a 2-DE proteomic approach followed by a bioinformatic analysis by the PDQuest v.8 program, to examine the expression of proteins in uninfected and infected cells at different times (20 min, 120 min and 24 h) and different multiplicities of infection (MOI) of 2 and 20. This analysis allowed us to clearly identify differences in the expression of proteins in CEBs when being infected with S. aureus, a decrease in the expression of proteins of the cells was observed to be infected. It was found that by increasing the exposure time of the CEBs to S. aureus and a higher MOI, there is a proportional increase in protein expression.

El endotelio es una monocapa de células que recubren el interior de los vasos sanguíneos, este se encuentra entre la sangre y los tejidos, cumple con múltiples funciones biológicas fundamentales. Por otro lado, este tipo de células pueden ser infectadas por una serie de bacterias Gram positivas como Staphylococcus aureus. Esta bacteria puede ser responsable de una amplia gama de enfermedades que van desde infecciones en la piel y tejidos blandos hasta infecciones graves que pueden poner en riesgo la vida. Su forma de diseminación depende en gran medida de características particulares de virulencia, resistencia contra una amplia variedad de antibióticos y de la interacción proteína/proteína que ocurre dentro de la célula huésped. El presente estudio se realizó con el objetivo de conocer la respuesta a nivel proteómico de células endoteliales de cordón umbilical de bovino (CEB) en interacción con S. aureus. La hipótesis planteada fue que la fisiología de las CEB´s es modificada cuando establecen interacción con S. aureus, provocando un cambio en sus perfiles proteicos. Dicha hipótesis se comprobó utilizando un enfoque proteómico 2-DE seguido de un análisis bioinformático por el programa PDQuest v.8, para examinar la expresión de proteínas en células no infectadas e infectadas a diferentes tiempos (20 min, 120 min y 24 h) y diferentes multiplicidades de infección (MOI) de 2 y 20. Este análisis nos permitió identificar claramente diferencias en la expresión de proteínas en CEB´s al ser infectadas con S. aureus, se observó una disminución en la expresión de proteínas de las células al ser infectadas. Se encontró que al aumentar el tiempo de exposición de las CEB´s a S. aureus y a una MOI mayor existe un aumento proporcional de la expresión de proteínas.