Construcción de un vector para la sobreexpresión del gen de oleosina (PaOLE) de aguacate "nativo mexicano" (Persea americana var. Drymifolia)

Abstract

The “Nativo Mexicano” Avocado is an economically important crop in Michoacán, because it is used as a rootstock for the cultivar Hass. The Mexican avocado presents a particular genetic characteristic that allows it to grow at altitudes between 1800 and 2000 m.a.s.l. and in a cold temperate climates. Its fruit contains up to 30% of lipids in fresh weight, this variety being the one with the highest oil content. The PaOLE gene (Persea americana Oleosin) has a 477 pb size and encodes a protein present in the mesocarp, its weight are 17.5 kDa and It is found as a structural protein stabilizing oil bodies (oleosomes). The store ability of high concentrations of lipids in the avocado mesocarp its confer in the oleosomes, however, it’s unknown if is the only physiological role by oleosin in the “Nativo Mexicano” avocado, and it´s important investigates other possible functions in mesocarp of the PaOLE gene. The heterologous expression of PaOLE in other plants will allow to know the role of this gene in the oil bodies formation, which is putative related in the cold stress tolerance, for this the pCambia2301 :: PaOLE vector were generated for heterologous expression in plants which contains the CaMv35S promoter and KanR, LacZ and GUS reporter genes.

El Aguacate Nativo Mexicano es un árbol de importancia económica en Michoacán, ya que es utilizado como portainjerto para el cultivar “Hass”. El Aguacate Nativo Mexicano presenta características genéticas particulares que le permite crecer en altitudes entre 1800 y 2000 m s.n.m y en un clima templado frío. Su fruto contiene hasta 30% de lípidos en peso fresco, siendo esta variedad la que más contenido de aceites presenta. El gen PaOLE (Persea americana Oleosina) posee un tamaño de 477pb, codifica para una proteína denominada oleosina, la cual fue identificada en mesocarpo, con un peso de 17.5 kDa. Se encuentra como proteína estructural estabilizando cuerpos de aceite llamados oleosomas. Dichos oleosomas le confieren la capacidad de almacenar altas concentraciones de lípidos en el mesocarpo, sin embargo, se desconoce si este es el único papel fisiológico que desempeña la oleosina en el Aguacate Nativo Mexicano, por ellos es importante investigar otras posibles funciones del gen PaOLE en el mesocarpo. La expresión heteróloga de PaOLE en otras plantas permitirá conocer el papel que desempeña dicho gen en la formación de cuerpos de aceites, lo cual se especula que se relaciona con la tolerancia a estrés por frío, para esto se generó el vector de expresión para plantas; pCambia2301::PaOLE el cual contienen el promotor CaMv35S y los genes reporteros KanR, LacZ y GUS.