Estandarización de ensayo de ELISA para determinación de anticuerpos IgG e IgM contra proteínas virales de dengue, chikungunya y zika

Abstract

infect humans and cause different morbidities among which we can highlight, Dengue, Zika and Chikungunya, which have manifestations that can range from mild to severe and reach permanent sequelae and even death, caused by severe bleeding. The spectrum of symptoms is very similar, which causes the differential diagnosis to be very complicated and, unfortunately, most of these infections go through a subclinical or undiagnosed picture, so the need to make a confirmatory diagnosis is of great importance for proper management of clinical representations and efficient epidemiological control. Laboratory techniques have been implemented in recent years to confirm clinical diagnosis by enzyme-linked immunoassay (ELISA) and rapid testing for viral proteins, however due to the similarity between flavivirus families one of the diagnostic challenges is generated to differentiate the classification of arboviruses as cross-reactivity has been noticed during ELISA trials with Anti-DENV antibodies, Anti-ZIKV leaving as a gold standard in clinical management to RT-PCR, which although it has a high reliability, depends on factors such as sampling time and the preservation of it to obtain an optimal result. In addition, this test is only available in large reference centers. For this reason, it is necessary to implement other diagnostic resources that are efficient and fast where through specific tests and that are inexpensive a better differential diagnosis is obtained.

Existen más de 100 tipos de arbovirus que son capaces de infectar directamente al ser humano y causar diferentes morbilidades entre los que podemos resaltar Dengue, Zika y Chikungunya, las cuales tienen manifestaciones que pueden ir desde leves a severas y alcanzan ocasionar secuelas permanentes e incluso la muerte, provocada por hemorragias graves. El espectro de síntomas es muy similar, lo que ocasiona que el diagnóstico diferencial sea muy complicado y, desafortunadamente, la mayor parte de estas infecciones pasan por un cuadro subclínico o no diagnosticado, por lo que se genera la necesidad de realizar un diagnóstico confirmatorio, es de gran importancia para un manejo adecuado de las representaciones clínicas y un eficiente control epidemiológico. En los últimos años se han implementado técnicas de laboratorio para confirmar el diagnóstico clínico por inmunoensayo ligado a enzima (ELISA) y pruebas rápidas para la detección de las proteínas virales, sin embargo debido a la similitud entre las familias de los flavivirus, se genera uno de los retos de diagnóstico para diferenciar la clasificación de los arbovirus ya que se ha notado reactividad cruzada durante los ensayos de ELISA con los anticuerpos Anti-DENV, Anti-ZIKV dejando como estándar de oro en el manejo clínico al RT-PCR, la cual si bien tiene una alta fiabilidad, depende de factores como el tiempo de la toma de muestra y la conservación de esta para obtener un resultado óptimo. Además, esta prueba solo está disponible en grandes centros de referencia. Por esta razón, es necesaria la implementación de otros recursos diagnósticos que sean eficientes y rápidos donde a través de pruebas específicas y que sean de bajo costo se obtenga un mejor diagnóstico diferencial.