An alternative to avoid or reduce the use of synthetic fungicides for the control of the fungus Botrytis cinerea, causal agent of gray mold in blackberry (Rubus fruticosus Cv. Tupi), is the in vitro selection of mutant lines showing enhanced tolerance, using sterile fungus filtrate as a selection agent. With this objective, the blackberry micropropagation system was established to obtain plant mutants by gamma irradiation of shoots, making the selection of tolerant plantlets in culture medium with sterile B. cinerea filtrate and confirming the fungus-tolerance with in vitro bioassays. The in vitro cultures of R. fruticosus Cv. Tupi were established of apical and axillary buds of adult plants cultured in greenhouse in the Murashige and Skoog (MS) medium with 1.0 mg/L of benzyladenine (BA) and 0.05 mg/L of naphtalenacetic acid (NAA), 30 g/L of sucrose, pH 5.7, 8 g/L of agar and 500 mg/L of ampicillin, following an effective aseptic method, obtaining a 70% survival of the explants. Subsequently, apical buds of initial shoots obtained 30 days of culture, were cultivated in MSB (shoot induction medium) with 1.0 mg/L of BA and 0.06 mg/L of indolebutyric acid (IBA), obtaining 13 shoot/explant, of 2 cm of length, at 28 days of culture. The rooting shoots occurred in the same culture medium, generating plantlets of 4 cm in height within 60 days of culture. All in vitro cultures were incubated in culture room conditions (25 C, 16 h photoperiod light, 132 μmol/m2s). The micropropagated plantlets were successfully acclimatized under greenhouse conditions for 30 days, using peat moss:perlite (1:1) as substrate, presenting a 100% survival and growth average 7.8 cm in length.
Una alternativa para evitar o bien disminuir el uso de fungicidas sintéticos para el control del hongo Botrytis cinerea, agente causal de la podredumbre gris en el cultivo de zarzamora (Rubus fruticosus Cv. Tupi), es la selección in vitro de líneas mutantes tolerantes a hongos, utilizando el filtrado de hongo estéril como agente de selección. Con este objetivo, se estableció el sistema de micropropagación de zarzamora para obtener mutantes por irradiación gamma de brotes, realizando la selección de plántulas tolerantes en medio de cultivo con filtrado estéril de B. cinerea y confirmando la tolerancia a este hongo en bioensayos in vitro. Los cultivos in vitro de R. fruticosus Cv. Tupi se establecieron de yemas apicales y axilares de plantas adultas cultivadas en invernadero en medio Murashige y Skoog (MS) con 1.0 mg/L de benciladenina (BA) y 0.05 mg/L de ácido naftalenacético (ANA), 30 g/L de sacarosa, pH 5.7, 8 g/L de agar y 500 mg/L de ampicilina, siguiendo un método efectivo de asepsia, obteniendo un 70% de supervivencia de los explantes. Posteriormente, yemas apicales de brotes iniciales obtenidos a los 28 días de cultivo, se cultivaron en medio inductor de brotes MSB con 1.0 mg/L de BA y 0.06 mg/L de ácido indolbutírico (AIB), logrando una producción de 13 brotes/explante, de 2 cm de longitud, a los 28 días de cultivo. El enraizado de éstos ocurrió en el mismo medio de cultivo, generando plántulas a los 60 días del cultivo de hasta 4 cm de altura. Todos los cultivos in vitro fueron incubados en condiciones de cuarto de cultivo (25 C, 16 h luz fotoperiodo, 132 μmol/m2s). Las plántulas micropropagadas fueron exitosamente aclimatadas bajo condiciones de invernadero durante 30 días, al cultivarse en turba:agrolita (1:1), presentando un 100% de supervivencia y un crecimiento promedio de 7.8 cm de longitud.
