Evaluación de las estrategias de antagonismo de una cepa silvestre de Trichoderma atroviride

Abstract

In vitro antagonistic capacity of a strain of Trichoderma atroviride (CMU-08) against different phytopathogens was evaluated in this study, through assays of confrontation in dual cultures, of inhibition by volatile compounds and antibiosis using malt extract agar (AEM), potato-dextrose agar (PDA) and Vogel minimum media (MMV). The antagonism of strain CMU-08 towards Fusarium sp. in confrontation assays was Type 1 in the three culture media, in the case of Colletotrichum gloeosporioides the greatest inhibition was through the production of volatile metabolites, being 92.8% in MMV. Phytophthora cinnamomi, was efficiently antagonized by confrontation and antibiosis with 70.2% inhibition in MMV; volatile inhibition for Botrytis cinerea was 67.0% in AEM. No basal activity of β-1,3 glucanase and chitinase of the CMU-08 strain of T. atroviride was found in basal condition using minimal Vogel (MMV) and induction medium in MMV supplemented with cell walls. The activity of β-1,3 glucanase induced by cell walls (0.5% w / v) of B. cinerea (Bc) reached maximum (484.1 ± 223.9 U / μL) at 18 h of incubation, while in the presence of Fusarium sp. (Fsp) showed the maximum (721.0 ± 53.1 U / μL) at 12 h.Chitinase activity in medium supplemented with Bc and Fsp cell walls was detected from six hours of incubation, reaching the maximum in both cases, with 1625.6 (± 803.4) U / μL and 2671.3 (± 542.9) U / μL, respectively. In dual cultures it was observed that the three chitinase genes, ech42, chit33 and chit36, as well as the gluc18 gene encoding an endoglucanase are expressed during and after the contact of CMU-08 with Fusarium sp. The expression of these genes is greater after contact with the phytopathogen.

En el presente trabajo se evaluó la capacidad antagónica in vitro de una cepa de Trichoderma atroviride (CMU-08) contra distintos fitopatógenos, mediante ensayos de confrontación en cultivos duales, de inhibición por compuestos volátiles y antibiosis empleando agar extracto de malta (AEM), agar papa-dextrosa (PDA) y medio mínimo Vogel (MMV). El antagonismo de la cepa CMU-08 hacia Fusarium sp. en los ensayos de confrontación en los tres medios de cultivo fue Tipo 1, en el caso de Colletotrichum gloeosporioides se encontró la mayor inhibición a través de la producción de metabolitos volátiles, siendo de 92.8% en MMV. T. atroviride antagonizó eficientemente mediante confrontación y antibiosis a Phytophthora cinnamomi, con 70.2% de inhibición en MMV; la inhibición por volátiles para Botrytis cinerea fue de 67.0% en AEM. No se encontró actividad basal de β-1,3 glucanasa y quitinasa de la cepa CMU-08 de T. atroviride en condición basal empleando medio mínimo Vogel (MMV) y de inducción en MMV suplementado con paredes celulares. La actividad de β-1,3 glucanasa inducida por paredes celulares (0.5% p/v) de B. cinerea (Bc) alcanzó el máximo (484.1±223.9 U/μL) a las 18 h de incubación, mientras que en presencia de paredes celulares de Fusarium sp. (Fsp) mostró el máximo (721.0±53.1 U/μL) a las 12 h. La actividad de quitinasa en medio suplementado con paredes celulares de Bc y Fsp se detectó desde las seis horas de incubación, alcanzando ahí el máximo en ambos casos, con 1625.6 (±803.4) U/μL y 2671.3 (±542.9) U/μL, respectivamente. En cultivos duales se observó que los tres genes de quitinasas, ech42, chit33 y chit36, así como el gen gluc18, codificante de una endoglucanasa se expresan durante y después del contacto de CMU-08 con Fusarium sp. La expresión de estos genes es mayor después del contacto con el fitopatógeno.