Bovine mastitis is a disease characterized by inflammation of the mammary glands that causes significant economic losses in dairy farming. Staphylococcus aureus is the predominant pathogen in cases of subclinical mastitis, the highest incidence of which occurs during the peripartum period. Bovine mammary epithelial cells (BMEC) act as the first line of defense by producing cytokines, antimicrobial peptides, nitric oxide (NO), among others. Reports from the working group have shown that 17β-estradiol (50 pg/ml) reduces the internalization of S. aureus into BMEC (40%). On the other hand, the peptide ƴ-thionin (100 ng/ml) reduces the internalization of S. aureus (~50%). In this work, we evaluate the combined effect of both molecules during the internalization of S. aureus into BMEC. Three treatments were assessed: 1) addition of 17β-estradiol (50 pg/ml) and ƴ-thionin (5, 25,100, 150, and 200 ng/ml) for 24 h, 2) 17β-estradiol 24 h, and the addition of ƴ-thionin for 24 h, and 3) similar to treatment 2 but reversing the order of the compounds. The results showed that the treatments did not affect the bacterial growth or the viability of the BMEC. In addition, treatment 1 (ƴ-thionin 100 ng/ml and 17β-estradiol 50 pg/ml) had the greatest effect on the decrease in bacterial internalization (~50%). For its part, the conditioned medium of the BMEC treated with ƴ-thionin (100 ng/ml) and 17β-estradiol (50 pg/ml) reduced bacterial viability (~31.4%) and showed an increase in NO production. The results suggest that the decrease in bacterial internalization with the joint treatment of ƴ-thionin (100 ng/ml) and 17β-estradiol (50 pg/ml) is due to IIR elements secreted into the medium by BMEC as well as by the production of NO that could favor the resolution of the infection.
La mastitis bovina es una enfermedad caracterizada por la inflamación de la glándula mamaria que ocasiona pérdidas económicas importantes en la ganadería lechera. Staphylococcus aureus es el patógeno predominante en los casos de mastitis subclínica, cuya mayor incidencia ocurre durante el periparto. Las células epiteliales mamarias bovinas (CEMB) actúan como primera línea de defensa produciendo citocinas, péptidos antimicrobianos, óxido nítrico (NO), entre otros. Reportes del grupo de trabajo han mostrado que el 17β-estradiol (50 pg/ml) reduce la internalización de S. aureus en las CEMB (40%). Por otra parte, el péptido ƴ-tionina (100 ng/ml) reduce la internalización de S. aureus (~50%). En el presente trabajo se planteó evaluar el efecto conjunto de ambas moléculas durante la internalización de S. aureus en las CEMB. Se evaluaron tres tratamientos: 1) Adición conjunta de 17β-estradiol (50 pg/ml) y ƴ-tionina (5, 25,100, 150 y 200 ng/ml) durante 24 h, 2) 17β-estradiol 24 h, y la adición de ƴ-tionina por 24 h, y 3) similar al tratamiento 2 pero invirtiendo el orden de los compuestos. Los resultados mostraron que los tratamientos no afectaron el crecimiento bacteriano ni la viabilidad de las CEMB. Además, el tratamiento 1 (ƴ-tionina 100 ng/ml y 17β-estradiol 50 pg/ml) presentó el mayor efecto sobre la disminución de la internalización bacteriana (~50%). Por su parte, el medio condicionado de las CEMB tratadas con ƴ-tionina (100 ng/ml) y 17β-estradiol (50 pg/ml) redujo la viabilidad bacteriana (~31.4%) y mostró un aumento en la producción de NO. Los resultados sugieren que la disminución de la internalización bacteriana con el tratamiento conjunto de ƴ-tionina (100 ng/ml) y 17β-estradiol (50 pg/ml) se debe a los elementos de la RII secretados al medio por las CEMB, así como por la producción de NO que pudiera favorecer la resolución de la infección.
